MCDB 培养基
MCDB是为特定细胞设计的低蛋白和无血清培养的培养基,MCDB 131是MCDB培养基的一种,是由Knedler和Ham设计开发出来的,最初用于培养人微血管内皮细胞(HMVEC)。MCDB 131培养基除用于内皮细胞外,还可用于其它细胞类型,如肝细胞、平滑肌细胞、心肌细胞等。MCDB 131培养基不同于传统培养基之处在于,其含有微量元素、腐胺、腺嘌呤、胸腺嘧啶以及更高浓度的氨基酸和维生素,在使用时常与EGF、氢化可的松、谷氨酰胺以及低浓度血清搭配使用,血清的添加浓度须根据细胞类型而定。
针对广泛的细胞培养应用,我们提供多种组分的MCDB改良培养基。
成分说明:
货号 | L-谷氨酰胺 | D-葡萄糖 | 丙酮酸钠 | HEPES | 酚红 | 双抗 |
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HCY-BCM13001 | ★ | ★ | ★ |
L-谷氨酰胺(Glutamine)是细胞培养中所必需的一种营养元素,但其在溶液中不稳定,会自发降解,不含L-谷氨酰胺的培养基,可以根据研究需要任意调整L-谷氨酰胺的用量,在使用时添加新鲜的L-谷氨酰胺或其替代物更利于细胞的生长。
L-丙氨酰-L-谷氨酰胺(Alanyl-glutamine,Ala-Glu),又名丙氨酰谷氨酰胺、丙谷二肽,是一种高级细胞培养添加剂,可直接替代细胞培养基中的L-谷氨酰胺。L-谷氨酰胺(Glutamine)是细胞培养中所必需的一种营养素,但其在溶液中不稳定,会自发降解生成氨和焦谷氨酸,其中氨对细胞有害;而L-丙氨酰-L-谷氨酰胺在水溶液中十分的稳定,不会自发的降解。细胞利用其机制是:在细胞培养时,细胞会逐渐向培养液中释放一种肽酶,将L-丙氨酰-L-谷氨酰水解成L-丙氨酸和L-谷氨酰胺,而后细胞会将这两种水解产物吸收利用。细胞利用L-丙氨酰-L-谷氨酰的过程与流加培养策略相似,连续的将低浓度水平的L-谷氨酰胺加入到培养液中,从而提高了L-谷氨酰胺的利用率,且不会生成多余的氨,更利于细胞的生长。L-丙氨酰-L-谷氨酰可以代替等摩尔的L-谷氨酰胺,适用于所有的细胞,几乎无需适应,并且可以延长细胞的培养时间,减少传代次数,即节省了时间也节约了金钱。与添加 L-谷氨酰胺的培养基中培养的细胞相比,活性降低得更慢。 延滞期略微延长的原因是肽酶的释放和二肽的消化需要一定的时间。
葡萄糖可以根据研究需要,随意调节葡萄糖的浓度,方便快捷。高糖型培养基普遍应用于生长快、粘附性低的细胞、杂交瘤的骨髓瘤细胞、克隆细胞、DNA转染的转化细胞、各种原代病毒宿主细胞、单一细胞的培养以及疫苗的生产,例如利用CHO细胞表达EPO和生产乙肝疫苗。低糖培养基更适合代谢作用较慢、依赖性贴壁细胞的培养。
酚红在培养基中被用来作为PH值的指示剂,用以持续监测培养液的酸碱度,在低PH值时酚红使培养液呈黄色,而较高的PH值时使培养液呈紫色,PH值7.2~7.4时为红色,最适合细胞培养。但酚红也有一些缺点,研究表明酚红可以模拟固醇类激素(特别是雌激素)的作用,因此在用到雌激素敏感的细胞时(如乳腺组织),最好使用不含酚红的培养基。酚红会干扰流式细胞分析时候的检测。此外,一些无血清培养基的配方中若存在酚红会干扰钠-钾平衡。
本产品含有多类细胞培养所需的氨基酸、维生素、无机盐等多种成分,但不含蛋白质、脂类或任何生长因子,故此产品需搭配血清或无血清添加物使用。
注意事项
- 本产品经过滤除菌,使用时应注意无菌操作,避免污染;
- 为保持本产品的最佳使用效果,请勿进行冻融处理;
- 本产品仅用于科研或进一步研究使用,不用于诊断和治疗。